INESTABILIDAD CROMOSOMICA CON DIEPOXIBUTANO
- Escrito por: Edgardo Baialardo
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Sinónimo: TEST DEB
Tipo de muestra: sangre
Código: 997418Material de Recolección: sangre entera con Heparina en jeringa
Condiciones de toma de muestra: no es necesario ayuno - Volumen 1 a 3 ml de sangre
en condiciones de esterilidad.
Conservación: Conservar a temperatura ambiente. Enviar dentro de las 24 hs de
extraída la muestra / no congelar .
Recepción en el laboratorio: un martes por mes, a determinar por el Servicio de
Genética, de 8:00 a 12:00 hs (sin que haya un día feriado próximo)
Laboratorio: Citogenética
Condiciones y requisitos para las muestras derivadas desde otras Instituciones: No se
aceptan derivaciones.
Tiempo de entrega de los resultados: El tiempo de entrega dentro de los 30 días
dependiendo de la demanda de turnos y de la urgencia de cada caso.
1. Metodología: Sembrar 2 cultivos en tubos cónicos (espontáneo y DEB) de cada una
de las 2 muestras celulares de la siguiente manera:
a) Paciente y control negativo: 9 ml de mix de siembra A ) + 1 ml sangre periférica...
A un cultivo de cada muestra celular, agregar 20 µl de solución de trabajo DEB para
obtener una concentración final de DEB de 0.1µg/ml AL MOMENTO DE LA SIEMBRA.
Por cada muestra celular se tendrá un cultivo sin tratamiento que servirá para
obtener la frecuencia espontánea de aberraciones cromosómicas y otro cultivo con
DEB para determinar la frecuencia inducida de aberraciones cromosómicas.
b) Control positivo: (línea linfoblastoidea VU817) 2-3x10 6 en 5ml del medio RPMI
suplementado adecuadamente para el crecimiento de la linea. Se hace un cultivo
sin y otro con DEB. Agregar 10 µl de solución de trabajo DEB (volumen de trabajo
es 5ml) para obtener una concentración final de DEB de 0.1µg/ml AL MOMENTO DE
LA SIEMBRA
.Incubar todos los cultivos a 37°C durante 72 hs en la estufa que corresponda.
Pasado el tiempo de incubación se procede a la cosecha y más adelante a la obtención
de los preparados para el análisis citogenético. Se cuentan rupturas en el análisis al
microscopio con100x (microscopio con platina automatizadas, captura de imágenes y
software de análisis).
Modalidad de informe de resultados al paciente:
El médico entrega el resultado al paciente volcado al sistema, previa solicitud de turno
por el paciente.